磁力架在樣品分離中的應(yīng)用技巧

　　磁力架是基于磁吸分離原理實(shí)現(xiàn)目標(biāo)樣品富集、純化的工具，廣泛用于分子生物學(xué)、微生物檢測(cè)、臨床檢驗(yàn)等領(lǐng)域，搭配磁性微球 / 磁珠使用時(shí)，掌握以下技巧可大幅提升分離效率與樣品純度。
 

　　一、 基礎(chǔ)操作技巧(通用型，新手必看)
 

　　1. 磁珠與樣品的充分結(jié)合
 

　　加磁珠后，需將樣品管輕柔顛倒混勻(避免劇烈震蕩產(chǎn)生氣泡)，室溫靜置或恒溫孵育，孵育時(shí)間根據(jù)磁珠說明書調(diào)整(通常 5–20 min)。
 

　　對(duì)于粘稠樣品(如血液、組織勻漿)，可適當(dāng)延長(zhǎng)孵育時(shí)間，或低速渦旋(轉(zhuǎn)速<1000 rpm)10–20 s，促進(jìn)磁珠與目標(biāo)物質(zhì)結(jié)合。
 

　　2. 磁吸分離的最佳操作
 

　　將樣品管垂直放入磁力架卡槽，確保管壁與磁條緊密貼合，保證磁吸力度均勻。
 

　　靜置時(shí)間需足夠：普通磁力架靜置 1–3 min，待磁珠完全吸附至管壁、溶液澄清后，再進(jìn)行下一步操作；高黏度樣品可延長(zhǎng)至 5 min。
 

　　嚴(yán)禁未完全磁吸時(shí)吸液，否則會(huì)導(dǎo)致磁珠流失，降低回收率。
 

　　3. 洗滌與洗脫的關(guān)鍵細(xì)節(jié)
 

　　洗滌時(shí)，先將樣品管從磁力架取下，加入洗滌液后輕柔混勻，再放回磁力架磁吸，待溶液澄清后棄去廢液，重復(fù)洗滌 2–3 次。
 

　　洗脫時(shí)，取下樣品管，加入洗脫液后充分混勻，可根據(jù)需求恒溫孵育 5–10 min，再放回磁力架磁吸，吸取上清液即為純化后的目標(biāo)樣品。
 

　　二、 不同場(chǎng)景的專項(xiàng)應(yīng)用技巧
 

　　1. 核酸提取場(chǎng)景
 

　　選擇適配核酸類型的磁珠(如 DNA 磁珠、RNA 磁珠)，磁力架建議選八聯(lián)管磁力架，適配 96 孔板高通量操作。
 

　　磁吸分離時(shí)，保持樣品管直立，避免磁珠吸附不均；洗脫液建議用預(yù)熱的 TE 緩沖液或去離子水，提升核酸洗脫效率。
 

　　2. 細(xì)胞分選場(chǎng)景
 

　　選用大孔徑磁力架或?qū)Ｓ眉?xì)胞分選磁力架，避免擠壓細(xì)胞導(dǎo)致破裂。
 

　　磁吸過程中保持低溫環(huán)境(4℃)，減少細(xì)胞活性損失；分選后用培養(yǎng)基重懸細(xì)胞時(shí)，需緩慢吹打，避免細(xì)胞成團(tuán)。
 

　　3. 蛋白純化場(chǎng)景
 

　　搭配蛋白特異性磁珠使用，磁力架選擇微量離心管磁力架，適合小體積樣品(0.5–2 mL)。
 

　　洗滌液需含適量鹽離子，降低非特異性結(jié)合；洗脫時(shí)可通過調(diào)整 pH 值或加入競(jìng)爭(zhēng)肽，提高蛋白純度。
 

　　三、 提升分離效果的避坑技巧
 

　　磁力架選型匹配：小體積樣品(<500 μL)用微量磁力架，高通量實(shí)驗(yàn)用 96 孔板磁力架，避免 “大材小用” 或 “小架大用” 導(dǎo)致的分離不均。
 

　　避免磁珠團(tuán)聚：磁珠儲(chǔ)存時(shí)需密封避光，使用前恢復(fù)至室溫并輕柔混勻；若出現(xiàn)團(tuán)聚，可低速渦旋后再使用。
 

　　防止交叉污染：不同樣品需使用獨(dú)立的磁力架卡槽或一次性套管，實(shí)驗(yàn)后及時(shí)清潔磁力架表面(用 75% 乙醇擦拭，晾干后使用)。
 

　　優(yōu)化磁吸時(shí)間：根據(jù)樣品體積和磁珠濃度調(diào)整，體積越大、磁珠濃度越高，所需磁吸時(shí)間越長(zhǎng)，以溶液完全澄清為標(biāo)準(zhǔn)。
 

　　四、 維護(hù)保養(yǎng)輔助技巧
 

　　實(shí)驗(yàn)后及時(shí)清理磁力架表面殘留的液體和磁珠，避免磁珠殘留影響后續(xù)吸附效果。
 

　　磁力架應(yīng)遠(yuǎn)離強(qiáng)磁場(chǎng)環(huán)境和尖銳物品，防止磁條磁力衰減或外殼損壞。